Чтобы верно определить, чем больна птица, ветеринарный специалист проводит комплексную диагностику, состоящую из нескольких этапов.
Этап 1. Клинический осмотр питомца и опрос его владельца (сбор анамнеза).
Этап 2. Выполнение стандартных диагностических тестов:
Очень часто бывает, что только по результатам вышеперечисленных тестов поставить точный диагноз проблематично, т.к. большинство болезней у птиц имеют схожую симптоматику.
На втором этапе диагностики специалист может получить точный диагноз, список дифференциальных диагнозов, либо не получить ничего. То есть врач может видеть результаты выполненных исследований, наблюдать симптомы, характерные для нескольких заболеваний, и при этом не иметь возможности поставить точный диагноз.
В такой ситуации на помощь приходят ПЦР-тесты, в основе которых лежит полимеразная цепная реакция.
Предлагая владельцу птицы взять материал для проведения ПЦР-теста, ветеринарный специалист слышит вопросы:
— А зачем это нужно?
— Почему так долго ждать результат?
— Почему исследование стоит так дорого?
— Почему результаты ПЦР-теста могут быть неоднозначными?
Постараемся на них ответить.
ПЦР-исследование биоматериалов птиц проводится с помощью специальных тест-систем не в клинике, а в специализированной «птичьей» лаборатории.
Реагенты, которые содержатся в тест-системах, способны выявить конкретных возбудителей болезней птиц. Их принцип работы основан на поиске генетического материла (ДНК) определенного микроорганизма. Например, тест-система для определения хламидиоза и тест-система для определения аспергиллеза – это два разных реактива, два разных исследования.
Часто приходят «ложно отрицательные» результаты ПЦР-тестов. Существует ряд причин, влияющих на результат:
— тип возбудителя и его преимущественная локализация;
— способ и качество взятого от птицы биоматериала.
Возможность врача добраться до интересующей области и взять биоматериал может быть ограничена. Например, у живой птицы нельзя взять смывы со слизистой желудка или из синусов ее черепа, поэтому приходится брать материал «откуда возможно». Чаще всего на анализ сдаются помет, кусочки кожи, смывы из ротовой полости или содержимое зоба. Но в каком именно материале патоген будет содержаться в достаточном для его определения количестве – большой вопрос. Искать возбудителя пневмонии в помете птицы менее перспективно, чем в мазке из содержимого ее зоба.
Большие сложности связаны с диагностикой системных инфекций птиц. Обнаружить патогены крайне тяжело, т.к. они неравномерно выделяются из организма животного. Возбудители хламидиоза, аспергиллеза или микобактериоза могут обитать в инфекционных гранулемах, образовавшихся в органах-«мишенях», и вовсе не выделяться в окружающую среду, а могут неравномерно выходить вместе с пометом или содержимым зоба. Следовательно, любой материал, взятый в разное время от одной и той же птицы, может содержать или не содержать возбудителей инфекции, что сказывается на результатах исследования.
Еще один вариант лабораторной диагностики – микробиологические посевы.
Этот вид диагностики предназначен для определения грибов и бактерий в биоматериале, а также их чувствительности к лекарственным средствам. Чтобы создать необходимые условия для достоверной микробиологической диагностики, врачу необходимо:
— стерильным зондом взять мазок из той области организма птицы, в которой предполагается наличие возбудителя болезни;
— поместить биоматериал в специальную пробирку, в которой содержится транспортная среда для микрофлоры;
своевременно транспортировать пробирку в лабораторию.
При соблюдении правильного температурного режима длительность хранения материала в пробирке с транспортной средой будет достаточной, чтобы доставить его в диагностическую лабораторию.
Полученный для исследования материал лаборант сеет на специально подготовленную питательную среду, ждет активного роста культур, а затем изучает их под микроскопом, чтобы по характерному внешнему виду определить возбудителя болезни. Далее определяет чувствительность выросшей культуры к различным антибиотикам и противогрибковым препаратам, которые наносит на питательную среду с активно растущим возбудителем болезни. По реакции культуры на образцы препаратов лаборант делает выводы о чувствительности возбудителя к той или иной группе лекарственных препаратов.
Казалось бы, все просто. Но ряд факторов может повлиять на достоверность полученных результатов.
В первую очередь важна стерильность при взятии материала и посеве его на питательные среды. Специалист, который берет материал с помощью зонда, должен быть максимально внимателен, чтобы не допустить прикосновение зонда к нецелевой поверхности и обсеменение его «случайными» микроорганизмами.
В вопросах стерильности и определения результатов большую роль играют добросовестность, компетентность и профессионализм сотрудников микробиологического отделения лаборатории, соблюдение ими протоколов стерилизации посуды и правил стерильности при посеве материалов на питательные среды, точность определения выросших культур и знание специалистами допустимых норм, индивидуальных для различных видов птиц и млекопитающих. К примеру, вырастить микоплазмы на стандартных питательных средах не получится, даже если их количество в материалах, взятых от птицы, огромно. Для этого нужны специально разработанные для их определения питательные среды и соблюдение необходимых условий роста культур.
Некоторые патогены сложно «поймать» еще на стадии взятия материала, т.к. они искусно прячутся внутри тканей органов и/или образовавшихся гранулем и слабо выделяются в окружающую среду. Следовательно, и посев на питательные среды в таком случае будет неинформативен, т.к. возбудителей болезни в материале попросту нет.
Часто бывает, что в организме птицы сосуществуют несколько патогенных культур, и при посеве в чашку Петри они могут подавлять рост друг друга. На питательной среде могут вырасти не все имеющиеся возбудители, а только те, которые «оказались сильнее». При этом более сильные патогены могут оказаться менее значимыми для постановки диагноза.
Количество микроорганизмов, указанное в бланке анализов, может существенно отличаться от реального количества патогенов в организме птицы. Здесь важную роль играет участок, с которого был взят мазок для исследования. Например, реальное количество бактерий в гранулемах на легких будет существенно отличаться от количества таких же бактерий, обнаруженных в мазке, взятом из полости рта.
В условиях «пробирки» патогенам созданы все условия для активного роста на специализированных питательных средах. В организме птицы в реальных условиях патогены вынуждены бороться с иммунной системой животного, чтобы не погибнуть. К примеру, отращивать себе защитную капсулу, которая повышает устойчивость возбудителей к привычным воздействиям. И те препараты, к которым была выявлена повышенная чувствительность патогенов в условиях «пробирки», могут оказаться слабыми или бесполезными в реальных условиях лечения пациента.
Подведем итоги.
Учитывая сложности, связанные с проведением лабораторной диагностики и интерпретацией полученных результатов, неэффективно сдавать анализы «на все подряд» самостоятельно.
Существуют технические и экономические ограничения лабораторий и ветеринарных клиник в рамках города и страны в целом.
Ветеринарный врач при постановке диагноза будет руководствоваться не только результатами лабораторных исследований, но и собственными наблюдениями за клиническим течением болезни животного, а также применять практические навыки и использовать здравый смысл.
В ветеринарной клинике «Родентовет» доступна услуга взятия биоматериалов от птицы для проведения ПЦР- и микробиологических исследований. На приеме специалист может взять мазки из зоба и клоаки птицы или же порцию помета. После взятия материал направляется в аккредитованную московскую ветеринарную лабораторию. Срок выполнения анализа – 3–5 дней.
Записаться на прием к ветеринарным врачам нашей клинки можно, позвонив по телефону регистратуры +7(8452) 39-77-40 с 09.00 до 21.00 ежедневно.
Ветеринарный врач, к.в.н., Казаков Артем Аркадьевич
Ветеринарный врач, к.б.н., Бохина Оксана Дмитриевна
Ветеринарный врач Перерва Людмила Викторовна
Ветеринарный врач Ершова Серафима Вадимовна
24.05.2023
При поддержке antonmislawsky.com